المبدأ الأساسي للكروماتوغرافيا العمودية هو فصل المخاليط بناءً على الاختلافات في تقارب المكونات للطور الثابت والطور المتحرك. وهي تنطوي على تمرير سائل أو غاز (الطور المتحرك) عبر عمود مملوء بمادة صلبة (الطور الثابت)، حيث تنتقل المكونات المختلفة للخليط بمعدلات مختلفة بسبب تفاعلاتها المتباينة مع الطور الثابت.
وإليك كيفية العمل بمزيد من التفاصيل:
المرحلة الثابتة: يتم تعبئة العمود بمادة صلبة مثل هلام السيليكا أو الألومينا مما يوفر سطحاً لتفاعل مكونات الخليط معه. قد يكون الطور الثابت قطبيًا أو غير قطبي اعتمادًا على طبيعة الفصل.
المرحلة المتنقلة: مذيب أو خليط من المذيبات يتحرك خلال العمود. يحمل الطور المتحرك مكونات الخليط عبر الطور الثابت.
الانفصال: عند وضع الخليط على أعلى العمود تتفاعل مكوناته مع الطور الثابت بدرجات متفاوتة. قد يكون لبعض المكونات جاذبية قوية للطور الثابت (الامتزاز)، بينما قد يكون للمكونات الأخرى تفاعل أضعف وتتحرك بشكل أسرع عبر العمود.
شطف: أثناء تحرك الطور المتحرك عبر العمود، يتم فصل مكونات الخليط بناءً على ارتباطاتها التفاضلية بالطور الثابت. تتحرك المكونات ذات التفاعلات الأضعف مع الطور الثابت بشكل أسرع، بينما تتحرك المكونات ذات التفاعلات الأقوى بشكل أبطأ.
مجموعة: تخرج المكونات المنفصلة من العمود في أوقات مختلفة، ويمكن جمعها بشكل منفصل.
يستخدم كروماتوغرافيا العمود على نطاق واسع في الكيمياء لتنقية المركبات وفصل المخاليط.